[home][inhoud][inhoud bovenbouw][inhoud practicum][links][copyright]

Assimilatie-dissimilatie
Techniek 2.5

Meten van de fotosynthese

methode 3
Als bladgroenkorrels in het licht staan en zuurstof afgeven komen er uit de chlorphylmoleculen elektronen vrij (oxidatie). Deze elektronen kunnen een blauwgekleurde DCPIP oplossing kleurloos maken

(DCPIP (blauw) + 2H+ + 2 elektronen<---> DCPIPH2 (kleurloos)

De snelheid waarmee een blauwgekleurde suspensie van bladgroenkorrels groen wordt is een maat voor de fotosynthese.

De ontkleuring kan gemeten worden met de colorimeter of spectrofotometer (zie techniekkaart).

 

Het maken van een suspensie van bladgroenkorrels

Materiaal:

spinazie of sla

1. bufferoplossing met suiker (laten maken door TOA)

2.8 gram Na2HPO4 ,6.4 gram KH2PO4 ,102.8 gram sacharose , 37 gram KCL ,1 liter a.d.
ijs, mortier, kaasdoek , centrifuge

2. DCPIP oplossing in buffer(laten maken door TOA)

0.01 gram DCPIP (dichloorphenolindophenol) ? in 100ml buffer (zie boven)

 

 

Werkwijze

  • Ongeveer 5 gram stukjes bladschijf (zonder nerven) in een mortier
  • Voeg 10 ml bufferoplossing toe
  • Maal het bladmateriaal fijn met de stamper
  • Laat het mengsel snel door 4 lagen kaasdoek in een bekerglas lopen (eventueel door te knijpen
    erdoor persen).
  • Centrifugeer 2 buisjes met het mengsel 10 minuten (Denk eraan dat je in de centrifuge altijd een tweede buisje moet doen met een zelfde hoeveelheid vloeistof. (Vragen aan leraar)
  • Giet de vloeistof boven in het buisje af en voeg aan het ene buisje sediment 5 ml bufferoplossing
    met DCPIP toe en aan het controlebuisje 5ml buffer zonder DCPIP .
  • Roer met een glazenstaaf tot er een suspensie ontstaat.
  • De suspensie moet een beetje doorzichtig zijn. Als de suspensie te groen is moet je nog 5 ml bufferoplossing met DCPIP toevoegen aan buisje 1 en 5 ml buffer aan buisje 2.
  • Bewaar de suspensie in een bak met ijs.

 

Het meten van de snelheid van de fotosynthese

 

Werkwijze:

Maak onderstaande proefopstelling.

 

  • Gebruik absoluut schone cuvettes voor de colorimeter (of fotospectrometer)
  • Meng de suspensie voor iedere meting met de colorimeter .
  • Gebruik de spectrofotometer met een golflengte van ongeveer 600 nM.
  • Meet de transmissie tenminste iedere 5 minuten gedurende een half uur.
  • Gebruik de het controlebuisje om de meter iedere keer op 0 te zetten voor je een meteing doet.

    Zie verder techniekkaart colorimeter.
    Techniek 2.3
    Techniek 2.4