Als
bladgroenkorrels in het licht staan en
zuurstof afgeven komen er uit de
chlorphylmoleculen elektronen vrij
(oxidatie). Deze elektronen kunnen een
blauwgekleurde DCPIP oplossing kleurloos
maken
(DCPIP
(blauw) + 2H+ + 2 elektronen<--->
DCPIPH2 (kleurloos)
De
snelheid waarmee een blauwgekleurde suspensie
van bladgroenkorrels groen wordt is een maat
voor de fotosynthese.
De ontkleuring
kan gemeten worden met de colorimeter
of spectrofotometer (zie techniekkaart).
Het
maken van een suspensie van
bladgroenkorrels
Materiaal:
spinazie
of sla
1.
bufferoplossing met suiker (laten maken
door TOA)
2.8
gram Na2HPO4 ,6.4 gram KH2PO4 ,102.8 gram
sacharose , 37 gram KCL ,1 liter a.d.
ijs, mortier, kaasdoek ,
centrifuge
2.
DCPIP oplossing in buffer(laten maken door
TOA)
0.01 gram
DCPIP (dichloorphenolindophenol) ?
in 100ml buffer (zie boven)
Werkwijze
- Ongeveer
5 gram stukjes bladschijf (zonder nerven)
in een mortier
- Voeg
10 ml bufferoplossing toe
- Maal
het bladmateriaal fijn met de
stamper
- Laat
het mengsel snel door 4 lagen kaasdoek in
een bekerglas lopen (eventueel door te
knijpen
erdoor persen).
- Centrifugeer
2 buisjes met het mengsel 10 minuten (Denk
eraan dat je in de centrifuge altijd een
tweede buisje moet doen met een zelfde
hoeveelheid vloeistof. (Vragen aan
leraar)
- Giet
de vloeistof boven in het buisje af en
voeg aan het ene buisje sediment 5 ml
bufferoplossing
met DCPIP toe en aan het controlebuisje
5ml buffer zonder DCPIP .
- Roer
met een glazenstaaf tot er een suspensie
ontstaat.
- De
suspensie moet een beetje doorzichtig
zijn. Als de suspensie te groen is moet je
nog 5 ml bufferoplossing met DCPIP
toevoegen aan buisje 1 en 5 ml buffer aan
buisje 2.
- Bewaar
de suspensie in een bak met
ijs.
Het
meten van de snelheid van de
fotosynthese
Werkwijze:
Maak
onderstaande proefopstelling.